SDS-PAGE电泳跑胶的时候电压电流咋定？我这新买的电泳仪说明书写得跟天书一样

浓缩胶阶段一般80到100V就行，等样品压成一条线进分离胶之后再提到120V到150V，整个过程恒压跑就行不用管电流。120V跑两块胶电流大概在30到50mA之间，看你缓冲液新旧程度，跑60到90分钟差不多溴酚蓝到胶底。我们这边以前做Western配套用的也是这套参数，稳稳的没出过问题。

你朋友既然是跑科研的胶，电泳缓冲液最好现配现用别回收，回收超过两次电压会飘电流会涨跑得还慢。还有上样量别贪多，10孔梳子蛋白每孔上20到30μg就行，loading buffer一定要打够不然条带歪。

我倒觉得直接全程恒流跑更省心，每块胶给20mA电流大约恒定，电压自己会慢慢爬升从80V一直到150V左右，时间大概一个半到两小时。恒流的好处是不同批次胶之间重现性好，恒压跑缓冲液一稀就跑飘。